Módulo VI. Técnicas de inmunodiagnóstico
Capítulo 57. Aplicación de técnicas basadas en reacciones antígeno-anticuerpo secundarias
1. Introducción
2. Técnicas de aglutinación
2.1. Aglutinación directa
2.2. Aglutinación indirecta
2.3. Inhibición de la aglutinación
2.4. Prueba de antiglobulina (prueba de Coombs).
3. Técnicas de precipitación en gel
3.1. Inmunodifusión radial
3.2. Inmunodifusión doble
3.3. Inmunoelectroforesis
3.4. Inmunoelectroforesis en contracorriente
3.5. Electroinmunodifusión
3.6. Inmunofijación
3.7.- Técnicas de transferencia
4. Técnicas de precipitación en medio líquido
4.1. Turbidimetría
4.2. Nefelometría
5. Técnicas de fijación del complemento
6. Diagnóstico y seguimiento serológico de las enfermedades infecciosas.
6.1. Diagnóstico directo
6.2.- Diagnóstico indirecto
6.3.- Interpretación de resultados
6.4. Aplicación de técnicas de reacciones secundarias al diagnóstico serológico de enfermedades infecciosas.
Capítulo 58. Aplicación de técnicas basadas en reacciones antígeno-anticuerpo primarias
1. Introducción
2. Clasificación de inmunoensayos.
2.1. Reacciones de precipitación
2.2. Reacciones de aglutinación
2.3. Reacciones donde interviene el complemento.
2.4. Técnicas con reactivos marcados.
2.5. Otras
3. Representación de datos y obtención de resultados.
4. Sistemas de amplificación de señales.
4.1. Sistema biotina-avidina (o estreptavidina).
4.2. Sistemas de amplificación química
4.3. Sistemas de amplificación enzimática
4.4. Sistemas de amplificación exponencial.
5. Enzimoinmunoensayos homogéneos. Inmunoensayo enzimático multiplicado
(EMIT).
6. Enzimoinmunoensayos heterogéneos. Ensayo de inmunoadsorción ligado a
enzimas (ELISA).
6.1. Competitivo
6.2. No competitivo
6.3. Tipo sandwich
7. Radioinmunoensayos.
8. Fluoroinmunoensayos.
8.1 Tipos de marcadores fluorescentes.
8.2.- Tipos de fluoroinmunoanálisis
9. Inmunoensayos quimioluminiscentes.
9.1. Quimioinmunoanálisis heterogéneos
9.2. Quimioinmunoanálisis homogéneos.
9.3. Enzimoinmunoanálisis quimioluminiscente
10. Test inmunocromatográficos.
11. Técnicas de inmunofluorescencia.
11.1 IF directa
11.2 IF indirecta
12. Técnica western blot
Capítulo 59. Detección de anticuerpos
1. Introducción.
2. Enfermedades autoinmunes y anticuerpos asociados.
2.1 Organoespecíficas
2.2 Sistémicas
3. Anticuerpos organoespecíficos y enfermedades asociadas
3.1. Diabetes mellitus tipo I
3.2. Miastenia gravis
3.3. Tiroiditis de Hashimoto
3.4. Cirrosis biliar primaria
3.5. Hepatitis autoinmune
3.6.- Otras: Enfermedad de Graves, Enfermedad de Goodpastoure, Anemia perniciosa, Pénfigo, Oftalmia simpática, Artritis reumatoide.
4. Anticuerpos no organoespecíficos.
4.1. ANTICUERPOS ANTINUCLEARES (ANA)
4.2. Ac Anti-Histonas
4.3. Ac Anti-DNA
4.4. Ac Anti-ENAS
4.5. Ac Anti-Centrómero
5. Determinación de autoanticuerpos por inmunofluorescencia indirecta.
6. Determinación de autoanticuerpos mediante ELISA.
Capítulo 60. Aplicación de técnicas de estudio de hipersensibilidad.
1. Introducción.
2. Conceptos clave.
3. Diagnóstico de enfermedades alérgicas:
3.1. Técnicas in vivo
3.1.1. Pruebas cutáneas
a) Pruebas intraepidérmicas o Prick test.
b) Pruebas intradérmicas.
c) Pruebas epicutáneas en parche.
d) Test de provocación.
3.2. Técnicas in vitro
3.2.1. Determinación de triptasa.
3.2.2. Determinación de la IgE total.
3.2.3. Determinación de la IgE específica.
Capítulo 61. Aplicación de técnicas de identificación de poblaciones celulares por citometría de flujo.
1. Introducción.
2. Preparación de suspensiones celulares.
2.1 Obtención de una suspensión celular.
2.2 Anticuerpos monoclonales.
2.3 Fluorocromos.
2.4 Técnicas de marcaje con anticuerpos monoclonales.
3. Funcionamiento de un citómetro de flujo.
3.1 Fundamentos de la citometría.
3.1.1 Parámetros de dispersión de la luz.
3.1.2. Intensidad de fluorescencia.
3.2 Componentes de un citómetro.
3.2.1 Sistema de fluidos.
3.2.2 Sistema óptico.
3.2.3 Sistema electrónico.
3.3 Calibración y estandarización en citometría.
3.4 Adquisición de muestras y análisis de datos.
4. Aplicaciones de la citometría de flujo.
5. Otras técnicas de separación celular.
Capítulo 62. Valoración de la funcionalidad de la inmunidad celular
1. Introducción
2. Conceptos básicos
3. Técnicas de separación de linfocitos por centrifugación en gradiente de Ficoll
4. Estudio de la funcionalidad de los linfocitos B
5. Estudio de la funcionalidad de los linfocitos T
6. Cuantificación de subpoblaciones de linfocitos T
7. Estudio de las células fagocíticas
8. Estudio de las alteraciones del complemento
Capítulo 63. Aplicación de estudios de tipificación HLA:
1. Introducción.
2. Características genéticas del Complejo Mayor de Histocompatibilidad (CMH).
3. Estructura del HLA:
3.1. HLA -I.
3.1.1. HLA -I. Clásica (Ia).
3.1.2. HLA -I. No Clásica (Ib).
3.2. HLA -II.
4. Funciones de las moléculas de HLA.
5. Relación entre enfermedad y HLA.
6. Procesamiento de Antígenos para HLA.
6.1. Vía citosólica.
6.2. Vía endosólica.
7. Métodos de tipificación de HLA y nomenclatura
7.1. Método tipificación serológica.
7.2 Métodos tipificación por técnicas de biología molecular.
7.3. Método detección celular.
7.4. Nomenclatura.
8. Aplicaciones de los estudios de histocompatibilidad
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